Elisa檢測(cè)實(shí)驗(yàn)有很多關(guān)鍵技術(shù)點(diǎn)，在前面的資訊內(nèi)容中也為大家介紹過不少。今日，我司要為大家講解ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣中的注意事項(xiàng)，以供大家參考：
   

1.細(xì)胞上清：前處理必須是細(xì)胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
   

2.腦脊液：前處理必須是細(xì)胞離心去除，每孔直接加100μl即可。如果濃度太高需稀釋時(shí)，用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
   

3.血清血漿：請(qǐng)加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。   

A 血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；    

B 血漿標(biāo)本，推薦用EDTA的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè)，標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。

C 血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑；

D 標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除。

E 請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè)，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。

4.組織勻漿液的樣本，要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，造成檢測(cè)結(jié)果的值偏低。
   

因組織勻漿液的樣本蛋白種類多，含量豐富，實(shí)驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行，否則就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體是加入50 ul樣本分析緩沖液后加50 ul標(biāo)本，需稀釋時(shí)，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。
                  

因?yàn)槟繕?biāo)蛋白不同，可能造成降解的蛋白類型可能不一樣，如果實(shí)驗(yàn)前通過文獻(xiàn)確定用哪種蛋白酶抑制劑，有針對(duì)性加入，可節(jié)省抑制劑。如果查不到相關(guān)文獻(xiàn)，可采用組合抑制的辦法確保蛋白不易被降解。 
   

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